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abmart抗体,IL1β,β tubulin,好像有效

wb小白,科研研一新手。[萌萌哒R][萌萌哒R]
今日仅验证种属是否可靠:左边为老鼠肺组织,右边为人原代支气管上皮细胞。
p2为β tubulin,位置在55kda处。
p3为未活化的白介素1β,位置在30-35kda之间好像。(具体忘了)
p4为活化的白介素1β,理论位置在17kda,但是因为用的胶没跑开10跟15的条带,虽然位置确实在那之上,但还是需要重复一下。
p5为货号。(没显示的IL-1β为R50520-1R1)
il18还没跑,后续换胶能跑开在stripping buffer洗了试试。
(至于为啥没放marker,用的赛默飞的26616,只上了3.5ul,加上我们显影仪最近老是难显出marker,merge了也看不到就没放了[失望R][失望R][失望R])
wb过程:
1.制胶:自制10%雅酶制胶试剂盒,1.0mm 10孔。
2.上样量:用的别人的蛋白记不清了,好像是30ug 15ul。
3电泳条件:90V上层压平,150V跑到底。
4.转膜条件:200mA湿转40min。膜0.45mm,sigama那个子品牌的膜,理论上0.2mm的更好,但是当时不知道实验室有[笑哭R]。
5.封闭:5%脱脂牛奶封闭2h
6.一抗:内参1:5000,IL-β 1:1000,碧云天一抗稀释液稀释,过夜4度孵育。
7.洗一抗:tbst15min三遍。
8.二抗:1:10000 孵1h,牛奶配置。
9.洗二抗:同7。
10.显影液:内参赛默飞高敏,il 1β 翌圣超敏。

[失望R]不知道为啥膜很脏,可能是裁膜手碰到过,以及牛奶有颗粒,后面再重复一次看看。也希望大佬们提提意见[哭惹R][哭惹R]孩子最近都跑自闭了。
最后鸣谢金主爸爸